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dpph法

DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)清除能力检测方法是一种评估抗氧化性能的常用方法,主要用于测定天然产物、药物和食品中的抗氧化能力。其检测原理是基于DPPH自由基的稳定性及其在特定波长下的强吸收特性,DPPH是一种稳定的氮中心自由基,在517nm波长处有最大吸收,其醇溶液呈紫色。当有抗氧化剂存在时,DPPH自由基的单电子可以被配对,导致溶液的吸光度降低,从而反映出抗氧化剂的清除能力。

具体操作步骤如下:

  1. 准备DPPH溶液和待测样品。将DPPH溶液稀释至适当浓度(通常为0.1mM),待测样品用乙醇溶解并调整至适当浓度。
  1. 取一定量的DPPH溶液和待测样品混合均匀,反应至少30分钟。
  1. 使用紫外可见分光光度计测量混合物的吸光度,以确定DPPH溶液的吸收情况。通常在517nm波长处测量吸光度。
  1. 计算样品的DPPH清除能力。通过比较混合物与原始DPPH溶液的吸光度来进行计算。

此外,DPPH清除法的优点包括成本低、易于操作、重现性好,适用于多种样品。但也存在一些局限性,如反应可能在某种程度上是可逆的,因此测得的抗氧化能力可能低于实际水平。此外,DPPH法主要检测单一自由基的清除能力,可能不足以全面评估样品的抗氧化性能。因此,在实验中结合其他抗氧化性能评估方法可以获得更加全面和准确的结论。

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